研究会（研究発表会）

磁性ビーズを用いたイムノキャプチャーPCR法によるチューリップ微斑モザイクウイルスの検出

守川俊幸¹・小林富成²・森井　環¹・多賀由美子¹・夏秋知英²（¹富山農技セ野菜花き試・²宇都宮大農）

チューリップ微斑モザイクウイルス：TMMMVの外被タンパク質遺伝子の一部103bpを増幅するプライマーセットdgCPとRNA Polymerase遺伝子の一部136bpを増幅するプライマーセットPMを用い，One step PCRによるウイルス検出を試みた。チューリップ球根は多糖類が多く，ISOGENやTRIzolを用いたRNAの抽出は容易でなかったが，TMMMV抗体を結合させた磁性ビーズを用いて磨砕液からウイルスを捕捉し，これを蒸留水に懸濁してPCRすることにより，das-ELISA法の100倍以上の感度でTMMMVを検出することができた。この磁性ビーズを用いたイムノキャプチャーPCR法（IC-PCR）は，有機溶媒を用いたRNA抽出を必要とせず，さらに微量遠心チューブにウイルスを捕捉する既往のIC-PCRに比べて抗体の消費量は少なく，操作は簡便である。なお，本法により本ウイルス保毒Olpidium brassicaeを接種したササゲやチューリップの根からも本ウイルスを検出することができた。